Qu'est-ce que le gel polyacrylamide?

Le gel de polyacrylamide est une solution couramment utilisée dans l'électrophorèse, le processus de séparation des molécules ou des particules de différentes tailles en les faisant passer par un gel et en appliquant un courant électrique.Il existe différentes recettes de gel de polyacrylamide, mais il contient généralement de l'acrylamide, de l'eau, un tampon, un persulfate d'ammonium (APS) et une tétraméthylélénédiamine (TEMED).Ce gel fonctionne comme une matrice qui sépare les composés en fonction de leur charge et de leur taille;Plus il y a d'acrylamide dans la solution de gel, mieux la séparation des molécules plus petites.En règle générale, ce gel est utilisé pour la séparation des protéines et de l'ADN.

Dans l'électrophorèse, un champ électrique fait que les particules chargées se déplacent à travers un gel, qui fonctionne comme un tamis pour faire séparer les particules de taille.Le gel absorbera toute chaleur produite à partir du courant électrique.Le gel de polyacrylamide est couramment utilisé dans cette procédure, mais l'agarose, un autre produit chimique qui crée un gel similaire, peut également être utilisé.

Les gels peuvent être faits d'une concentration variable, avec la quantité d'acrylamide allant d'environ 6% à 15%.Lors du mélange du gel, l'acrylamide n'est pas polymérisé, ce qui signifie qu'il reste comme des molécules uniques.L'ajout d'autres produits chimiques qui favorisent la liaison, tels que TEMED, amène les molécules à se relier en formant de longues chaînes et mdash;La partie polyacrylamide de polyacrylamide.

Le principal avantage du gel de polyacrylamide est que le nombre de liaisons de liaison et de dureté peut être contrôlé en fonction de la quantité initiale d'acrylamide et de TEMED.Un facteur principal de la concentration en acrylamide est la taille de l'analyse de la molécule.Plus les composés sont séparés, plus l'acrylamide est nécessaire;De très petites particules sont séparées en utilisant la concentration la plus élevée, 15%.

L'acrylamide fonctionne en contrôlant la quantité de frottement dans le gel;La dureté du gel détermine la quantité de friction.Les composés grands se déplaceront dans le gel plus lentement car il y a naturellement plus de frottement ou de résistance en raison de leur taille.Les composés plus petits se déplacent plus rapidement, car il y a moins de friction.Pour empêcher les petits composés de quitter le gel, plus d'acrylamide est ajouté pour créer plus de frottement.

Le gel de polyacrylamide d'ADN est utilisé pour séparer les brins d'ADN de longueur différente.Des morceaux d'ADN se sépareront aussi peu qu'un nucléotide, les composés qui composent chaque brin.Afin de savoir quelles pièces se réfèrent aux tailles spécifiques, une norme qui contient des fragments d'une taille connue est généralement exécutée avec des échantillons.Les pièces d'ADN sont ensuite comparées à la norme et la taille du brin est déterminée.

Une procédure similaire est utilisée pour déterminer la taille des protéines, le plus souvent celles du sang.Le sang contient deux principaux types de protéines: la globuline, une protéine de grande taille et l'albumine sérique, une très petite protéine chargée négativement.La séparation utilisant du gel de polyacrylamide est utilisée pour déterminer la quantité de chaque type.